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991.
《现代妇产科进展》2015,(3)
目的:对3个马凡综合征(MFS)家系及1例MFS患者的原纤维蛋白1基因(FBN1)进行基因检测,以明确致病突变,为患者提供遗传咨询及产前诊断。方法:应用高通量Ion Torrent半导体测序技术对3个MFS家系的先证者及1例MFS患者的FBN1基因进行检测,筛选致病突变位点,并用Sanger测序法验证。对1例胎儿FBN1基因相应的位点进行检测,以明确其受累情况。结果:患者P1 FBN1基因检测到c.7125_7126 del TG杂合性缺失突变,为可疑致病位点;家系1患者FBN1基因检测到IVS 27-1G>C(c.3464-1G>C)杂合性突变,为致病突变;家系2患者FBN1基因检测到c.4981G>C(p.Gly1661Arg)杂合性错义突变,为致病突变,胎儿携带同样突变;家系3患者FBN1基因检测到c.1546C>T(p.Arg516Term)杂合性无义突变,为致病突变。结论:应用高通量Ion Torrent半导体测序技术检测到3个MFS家系及1个MFS患者的致病基因突变,为临床诊断及遗传咨询提供分子遗传学依据,并对1例胎儿进行了产前诊断。 相似文献
992.
《现代妇产科进展》2015,(12)
目的:探讨外显子捕获-高通量测序技术检测室间隔缺损(VSD)胎儿遗传学病因的可行性。方法:选择超声心动图诊断为VSD且微阵列比较基因组杂交(a CGH)和G显带检测结果均正常的19例胎儿作为研究对象;将已知的63个人类先心病致病基因作为检测靶点制作成捕获芯片,对各个样本DNA进行外显子捕获后高通量测序,数据经过滤、数据库比对、生物学软件分析得到最终病理性突变位点;病理性突变位点用Sanger测序验证。结果:19例VSD胎儿中共检测到1540个基因突变位点,数据库比对、生物信息学分析后得到8个病理性突变位点:JAG1 c.1078TG(p.C360G),CHD7 c.6718GT(p.D2240Y),NOTCH2c.6131GA(p.R2044H),MYH7 c.77CT(p.A26V),ZFPM2 c.2107AC(p.M703L),CHD7 c.7198CT(p.R2400W),HAND2 c.341GA(p.S114N),MLL2 c.12140_12168del GGCCGTTAGCAATAGGAACTACCCCTGAG(p.G4047Vfs*5),其中MYH7、ZFPM2两个突变点为已报道突变,其余6例未见报道。8个突变位点的Sanger测序结果与高通量测序结果一致。父母溯源分析均为新发突变。结论:外显子捕获芯片用于VSD胎儿遗传学检测可提高阳性检出率,具有较好的临床应用价值。 相似文献
993.
目的探讨吸入3%氢气对四氯化碳(CCl4)损伤性大鼠生精细胞核糖体蛋白S6激酶(p70s6k)表达及其增殖功能的影响。方法将18只健康雄性SD大鼠随机分成对照组、CCl4组和氢气治疗组。对照组每周一、四背部皮下注射橄榄油(0.12ml/100g),CCl4组和氢气组每周一、周四皮下注射体积分数60%的CCl4-橄榄油(0.3ml/100g),连续4周。氢气组自实验的第22天吸入3%氢气,1h/d,连续7d。取右侧睾丸和附睾,行石蜡包埋切片,苏木素伊红染色和免疫组织化学染色。取左侧睾丸组织,行Western blotting检测。结果对照组睾丸生精小管内可见多层生精细胞,排列有续,结构完整。CCl4组睾丸生精小管细胞层数减少,结构紊乱,附睾管柱状上皮变薄;氢气组生精细胞数量和附睾管高柱状上皮细胞明显改善。CCl4组大鼠附睾精子密度较对照组降低,氢气组的精子密度明显高于CCl4组(t=4.91,P0.05)。免疫组织化学染色显示,氢气组生精细胞质中p70s6k(t=7.63,P0.05)和PCNA(t=20.08,P0.05)的表达明显强于CCl4组。Western blotting检测显示,氢气组睾丸组织中p70s6k的表达与CCl4组相比明显增强(t=3.64,P0.05)。结论吸入高浓度氢气能明显增强CCl4损伤性大鼠睾丸生精细胞p70s6k的表达,改善CCl4损伤引起的的生精细胞的增殖功能。 相似文献
994.
目的:转染及筛选鉴定能够稳定表达和分泌V γ9Vδ2 T细胞受体( TCR)双链单体的果蝇S2恒定细胞系。方法利用氯化钙转染法将TCR γ9-FB-pMT/V5-His B质粒、TCR δ2-JB-pMT/V5-His A质粒、pMT/Bip-BirA质粒和pCoHygro潮霉素质粒转染进S2细胞中,用潮霉素B筛选恒定细胞系后表达生物素化的结核特异性Vγ9Vδ2 TCR双链单体,并加以鉴定。结果斑点印迹试验、SDS-PAGE和Western blot表明细胞培养上清中有V γ9Vδ2 TCR单体,且已被成功生物素化。结论成功筛选出能稳定分泌表达Vγ9 V δ2 TCR的果蝇S2恒定细胞系,为研究γδ T细胞的免疫识别提供实验资料。 相似文献
996.
目的:采用直接测序法及克隆测序法确认新等位基因 MICA?008:05。方法采用 Sequence Base Typing ( SBT)法分型技术对MICA的多态性进行常规基因分型,采用克隆测序法进行确认并与已知的等位基因序列进行比对。结果发现1个样本在外显子3上有1个碱基位置与国际通用MICA数据库不相符。该基因与MICA?008:01:01相比在外显子3的碱基位置591出现突变( C→T),密码子位置174由TCC→TCT,相应编码氨基酸是同义突变。结论 DNA测序结果表明该基因序列为新的MICA等位基因,已提交GenBank,并被世界卫生组织HLA因子命名委员会正式命名为MICA?008:05。 相似文献
997.
998.
目的 研究角蛋白16 和17(K16、K17)在部分表皮肿瘤中的表达和意义。方法 采用免疫组化法检测K16、K17在正常皮肤、脂溢性角化病、日光性角化病、皮角、基底细胞癌、鳞状细胞癌中的表达。结果 K16、K17 在正常皮肤表皮各层呈阴性表达;在脂溢性角化病表皮各层中除了角质层外大多呈阳性表达;在日光性角化病表皮K16 均不表达,K17 除了角质层外在其他各层也不表达;K16 在皮角表皮棘层呈强阳性表达,但在其他各层均呈阴性表达,K17 在皮角表皮各层基本呈阳性或强阳性表达;在基底细胞癌中,K16、K17除了在棘层呈弱阳性表达外,在其他各层均呈阴性表达;在鳞状细胞癌中,K16 在基底层呈阴性表达,但在其他各层及K17 在表皮全层均呈阳性或强阳性表达。K16 除基底层外在肿瘤表皮其他各层表达比较差异均有统计学意义(均P<0.05);K17 在表皮各层表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 K16、K17的表达状况可为表皮肿瘤的鉴别诊断提供病理学方面的依据。 相似文献
999.
目的观察高海拔环境下大鼠脑组织海马区的细胞形态结构变化和S100B蛋白的表达,探索缺氧刺激后脑组织损伤和修复的机制。方法 120只健康成年SD大鼠,随机分成两组:模拟海拔5 000米组(实验组:H组)和海拔2 200米组(对照组:M组);H组经模拟海拔5 000米低压氧舱预处理3天,转移至海拔2 200米环境下饲养,M组不经模拟海拔5 000米低压氧舱预处理,直接在海拔2 200米环境饲养。两组又分为缺氧损伤后较低海拔环境恢复1、3、7、14、28天五个亚组,在相应时间点取脑组织,分别用Nissl、免疫组织化学染色方法染色,显微镜下观察海马区细胞结构,进行阳性细胞计数,并对相关结果进行分析。结果 Nissl染色可见M组大鼠海马区神经元排列较整齐、结构完整,未见明显损伤细胞;H组大鼠海马区神经元细胞数量减少、排列紊乱,其中H组1天和3天亚组出现明显的组织水肿,出现变性和核浓缩的损伤细胞;S100B免疫组化染色阳性细胞计数结果显示,H组S100B蛋白的表达在低压缺氧刺激后第1、3天明显高于M组对应时间点(P<0.05),其他时间点S100B蛋白表达量无统计学差异。结论高海拔低压缺氧环境下高表达的S100B蛋白诱导大鼠海马细胞形态和组织结构损伤。 相似文献
1000.
目的:分析七氟醚在不同麻醉深度下对老年腹腔镜手术患者术后认知功能的影响。方法选择于2013年10月至2014年10月间在本院接受腹腔镜手术治疗的老年患者120例作为研究对象,按照随机数表法分为两组各60例,观察组接受高浓度七氟醚麻醉(3%~5%,维持患者BIS值35~45),对照组接受低浓度七氟醚麻醉(1%~2%,维持患者BIS值50~60)。比较两组患者的认知功能、血清炎症因子及神经组织蛋白质S100水平等差异。结果(1)认知功能:观察组患者接受高浓度七氟醚麻醉后1 d、7 d的认知功能评分均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);(2)炎症因子:观察组患者接受高浓度七氟醚麻醉后7 d的血清白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);(3)神经组织蛋白质S100:观察组患者接受高浓度七氟醚麻醉后1 d、7 d的血清S100β蛋白水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论七氟醚深麻醉有助于减少对老年腹腔镜手术患者术后认知功能的损伤,降低全身炎症因子及S100β蛋白水平。 相似文献